[00317494]αs1- 酪蛋白的抗原表位制备得到的单抗及牛乳过敏原检测方法

项目介绍：

牛乳蛋白质含量高而且易吸收，但是其中的过敏原严重影响了婴幼儿的身体健康。目前国内外对牛乳过敏性疾病没有彻底有效的根治方法，防止牛乳过敏的主要有效手段是避免食入含有乳过敏原的食物。因此建立精确、快速的过敏原残留量的检测方法具有重要的意义。

1. 理论研究成果：

专著 ---《主要食物过敏原致敏机理的研究》

阐述主要食物过敏原牛乳、花生、鱼等过敏成分的识别、作用表位鉴定等研究，为基于作用表位建立检测方法提供理论依据。

2．本发明具有以下创新点：

利用本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位，制备的单克隆抗体，优于 αs1- 酪蛋白全蛋白作抗原获得的单克隆抗体。通过间接竞争 ELISA 方法检测 αs1- 酪蛋白为抗原，本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位制备的单克隆抗体其检出限低于为 10.49ng/mL，而 αs1- 酪蛋白全蛋白的单抗作为一抗时，检出限为 60.50ng/mL，前者的检测限具有明显的优势。此外，本发明的 αs1- 酪蛋白的抗原表位制备的单克隆抗体的最适工作浓度为稀释 10000 倍， 而 αs1- 酪蛋白全蛋白的单抗最适工作浓度则为稀释 5000 倍，同时以其建立的间接竞争 ELISA 方法的精确性和重复性也更优异。同时经过验证，本发明的单克隆抗体建议的方法精确性、重复性较好，能够有效的用于检测牛乳过敏原，具有推广应用价值。

市场背景： 虽然 ELISA 法灵敏性高、特异性强、快速、费用低，因而在过敏原检测中得到了广泛的应用，特别适用于食物中少量过敏原检测。但这种方法也有其局限性，对于存在交叉过敏反应的过敏原，即对于存在相似作用表位的过敏原间，ELISA 法常出现假阳性，因此制备出高特异性抗体对 ELISA 法检测牛乳中过敏原十分重要。同时在应用免疫学方法检测方面，抗体的质量与反应模式也是影响检测结果的关键因素。应用此种方法时，需要获得高质量的抗体选取合适的反应模式和有效的提取过敏原方法。在食品领域，抗体的制备多是用全蛋白来作为抗原，这样就会造成制备的抗体特异性不强，精确度不高。事实上，目前针对牛乳酪蛋白中其他致敏蛋白建立的间接竞争 ELISA 方法报道较多，但是针对 αs1- 酪蛋白作用表位建立的间接竞争 ELISA 方法报道较少。