[01228103]中华根霉12#固态发酵产饲用复合酶的研究

《中华根霉12#固态发酵产饲用复合酶的研究》项目于2009年1月列入黑龙江省教育厅科学技术研究项目。　　本课题以中华根霉12#为初发菌株，以豆类加工下脚料豆渣为主要原料，通过固态发酵生产复合酶，研究在不同培养条件下产复合酶系变化规律，以培养物中酶活力为检测指标，确定基本培养基组成和培养条件；通过测定酶残留活力方法确定酶的最适作用温度和热稳定性，最适作用pH和pH稳定性。经过大量实验研究，得到如下研究成果：　　（1）确定了中华根霉12#固态发酵产生复合酶的培养基组成和发酵条件。250mL三角瓶中装入10g干基，培养基组成为6g麸皮+4g豆渣+1mL0.2﹪硝酸钠，培养基料水比为1：2，接种量为103个孢子/g干基，培养温度为28℃，培养基初始pH值为自然，培养时间为96h。经检测，发酵产物中包含蛋白酶系、纤维素酶系、木聚糖酶系、淀粉酶系和果胶酶系五种复合酶系。　　（2）研究了中华根霉12#固态发酵所产复合酶的最适作用温度和最适作用pH值及稳定性。该复合酶系在禽畜体内温度和肠胃pH下适宜发挥催化活力，在30～40℃之间较稳定，在环境pH值为偏酸性时活力保存较好。　　（3）该复合酶无明显的急性毒性。　　技术的创新点为：　　（1）目前见报道的饲用复合酶菌株安全性不能确定，本项目以来源于南方小酒药的微生物中华根霉为菌种生产饲用复合酶，菌种来源相对较安全。　　（2）商品复合酶制剂往往是由单一菌种发酵生产的几种纯酶制剂按一定配方复配、稀释而成，其成本高、酶系较单一，难以满足底物成分复杂性的需要；且某些商品酶由于最适作用pH值和最适作用温度与禽畜肠胃环境关联性不强，限制了使用效果。本项目开展酶的稳定性研究，确定该复合酶系在禽畜体内温度和肠胃pH条件下适宜发挥催化活力。　　现已完成部分实验室阶段的研究工作，有待于进行动物饲养试验，验证在动物体内该复合酶催化抗营养因子转化为动物机体可利用的小分子物质的效果。