[00352474]新型抗肿瘤药物-重组平颏海蛇磷脂酶A2
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该成果通过构建平颜色海蛇毒腺CDNA文库及功能筛选，是了两种磷脂酶的A2(PLA2)新基因，PLA2是蛇毒中含量丰富的一类酶，具有结构的相似性和功能的复杂性。PLA2除了酶活性外，还蛤有多种生理活性，如神经毒、心脏毒、肌肉毒、细胞毒、溶血作用、出血作用、出血作用、水肿作用、促凝或抗凝作用等。不同来源的蛇毒PLA<,2>所具有上述生理作 用各不相同，每种PLA<,2>在一级结构上具有明显差异，因而预示着其功能上的特殊性，通 过设计引物，将两个编码PLA<,2>的成熟肽基因用PCR的方法扩增出来，克隆到融合表达载体pETTRX上，构建成表达质粒pETTRXPLA2。并在大肠杆菌中表达，得到了表达量的16%以上的PLA2融合蛋白，经肠激酶切割和及凝胶过滤两步纯化，研究得到了纯度的95%以上的目的蛋白，经肠激酶切割和进一步纯化，得到成熟的PLA2。对表达两种蛇毒PLA2进一步纯化，得到成熟的PLA2活性实验。