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[00335979]一种家猪印记基因Rasgrf1的鉴定方法

交易价格: 面议

所属行业: 生物化工

类型: 发明专利

技术成熟度: 通过小试

专利所属地:中国

专利号:CN201510080249.2

交易方式: 资料待完善

联系人: 安徽农业大学

进入空间

所在地:安徽合肥市

服务承诺
产权明晰
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
如实描述
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技术详细介绍

摘要:本发明公开了一种家猪印记基因Rasgrf1的鉴定方法,包括如下步骤:(1)采用PCR-SSCP-PAGE的方法查找外显子序列SNP;(2)总RNA的提取和cDNA的制备;(3)采用RT-PCR-RFLP方法鉴定印记状态;(4)目的基因蛋白水平的检测:包括石蜡组织切片的制作和免疫荧光观察;(5)亚硫酸氢盐修饰后测序的甲基化分析方法:确定猪Rasgrf1基因核心启动子区及该片段内CTCF结合区域GpG岛的分布情况,样品经亚硫酸盐处理后,设计特异性引物对其进行PCR扩增,而后测序进行甲基化分析。通过本发明所述方法对猪的Rasgrf1基因印记机制进行初步探讨,为皖南黑猪优良性状的开发和利用提供了依据。
摘要:本发明公开了一种家猪印记基因Rasgrf1的鉴定方法,包括如下步骤:(1)采用PCR-SSCP-PAGE的方法查找外显子序列SNP;(2)总RNA的提取和cDNA的制备;(3)采用RT-PCR-RFLP方法鉴定印记状态;(4)目的基因蛋白水平的检测:包括石蜡组织切片的制作和免疫荧光观察;(5)亚硫酸氢盐修饰后测序的甲基化分析方法:确定猪Rasgrf1基因核心启动子区及该片段内CTCF结合区域GpG岛的分布情况,样品经亚硫酸盐处理后,设计特异性引物对其进行PCR扩增,而后测序进行甲基化分析。通过本发明所述方法对猪的Rasgrf1基因印记机制进行初步探讨,为皖南黑猪优良性状的开发和利用提供了依据。

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