技术详细介绍
摘要：发明公开了一种大片段基因整合提高里氏木霉纤维素酶酶活的方法，属于基因工程领域。本发明通过多次同源重组将黑曲霉维素酶系相关的基因大片段一次性整合到里氏木霉基因组中，具体为将两段里氏木霉基因组片段、潮霉素抗性基因单元盒整合到黑曲霉基因组上，再以这两段片段为同源重组位点、潮霉素抗性为筛选标记将黑曲霉基因组上这两个位点之间的大片段整合到了里氏木霉基因组上，达到纤维素酶基因、非纤维素酶基因多克隆的效果，从而影响里氏木霉的代谢网络，提高里氏木霉的纤维素酶酶活。通过本发明方法得到的菌株的滤纸酶活是出发菌株的2.28倍。