[00283564]一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用
                
                    
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                        所属行业:
                                                
                            生物医药
                        
                        
                    
                    
                        类型:
                        发明专利
                    
                    
                    
                        技术成熟度:
                        正在研发
                    
                    
                    
                    专利所属地:中国 
                    专利号:CN201110289796.3
                    
                    
                        交易方式:
                        
                        
                        
                            技术转让
                        
                        
                        
                            技术转让
                        
                        
                        
                            技术入股
                        
                        
                        
                    
                    
                 
                
                    
                    
                    
                        联系人:
                                                                        江南大学
                        
                        
                    
                    
                    
                    
                        
                        
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                    所在地:江苏无锡市
                    
                    
                        - 服务承诺
 
                        - 产权明晰
 
                        - 
                            资料保密
                            
 对所交付的所有资料进行保密 
                         
                        - 如实描述
 
                        
                    
                 
             
            
            
         
        
            
                
技术详细介绍
            
            摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。
            
                摘要:一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用,属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先,PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因,构建了重组质粒pET-28a-lpgad,并在 BL21(DE3)成功表达,其次,粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD,并对其酶学性质进行初步研究,用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验,GABA累积浓度可达204.5g/L,摩尔转化率为97.92%,为进一步工业化应用打下了良好的基础。