[00247457]长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基
交易价格：
面议
所属行业：
家畜良种胚胎育种
类型：
发明专利
技术成熟度：
正在研发
专利所属地：中国
专利号：CN201110306604.5
交易方式：
技术转让
技术转让
技术入股
联系人：
科小易
进入空间
所在地：福建厦门市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基，其特征在于分离期胚盘明区的细胞，经机械吹打分散成单个细胞或小细胞团后，接种于STO饲养层，用上述鸡胚胎干细胞在专用培养基及37~38℃环境下培养，3~5天传代一次，专用培养基包括条件培养液600-900mL；胎牛血清50-150mL；鸡血清5-20mL；非必需氨基酸中的一种或几种混合物5-25mL；L-谷氨酰胺0.146-0.292g；β-巯基乙醇6-14μL；小鼠白血病抑制因子1—2×106IU；碱性成纤维细胞生长因子10-50μg；干细胞生长因子5-20μg，将上述成分用DMEM高糖培养基定容至1000mL，调pH值为7.2-7.5，条件培养液是这样获得的，培养BRL-3A细胞至细胞汇合后，收集培养细胞的上清液，离心分离后再经滤膜过滤所得即为条件培养液。本[发明专利]与已有技术相比，具有可以实现鸡胚胎干细胞的长期传代培养，并具有细胞增殖快、克隆获得率高的优点。
长期传代培养鸡胚胎干细胞的方法及其专用培养基，其特征在于分离期胚盘明区的细胞，经机械吹打分散成单个细胞或小细胞团后，接种于STO饲养层，用上述鸡胚胎干细胞在专用培养基及37~38℃环境下培养，3~5天传代一次，专用培养基包括条件培养液600-900mL；胎牛血清50-150mL；鸡血清5-20mL；非必需氨基酸中的一种或几种混合物5-25mL；L-谷氨酰胺0.146-0.292g；β-巯基乙醇6-14μL；小鼠白血病抑制因子1—2×106IU；碱性成纤维细胞生长因子10-50μg；干细胞生长因子5-20μg，将上述成分用DMEM高糖培养基定容至1000mL，调pH值为7.2-7.5，条件培养液是这样获得的，培养BRL-3A细胞至细胞汇合后，收集培养细胞的上清液，离心分离后再经滤膜过滤所得即为条件培养液。本[发明专利]与已有技术相比，具有可以实现鸡胚胎干细胞的长期传代培养，并具有细胞增殖快、克隆获得率高的优点。
