技术详细介绍
摘要：本发明公开了一套基于化脓性链球菌Cas9的精确的碱基编辑系统及其在哺乳动物细胞和/或胚胎基因编辑中的应用。所述碱基编辑系统由rAPOBEC1Cas9UGI表达载体和gRNA表达载体两部分组分组成；所述rAPOBEC1Cas9UGI表达载体是通过基因合成和分子克隆的方法将rAPOBEC1Cas9UGI的编码基因克隆到pcDNA3.1（‑）载体中得到；所述gRNA表达载体是通过酶切连接的方式将gRNA序列克隆到包含T7启动子的pDR274载体中得到。该系统能够应用于基因修饰、哺乳动物细胞模型、动物模型的构建，以及用于哺乳动物细胞和胚胎的基因治疗，具有很好的应用前景。