技术描述:
本发明公开了一种利用七叶苷和4-MUG从fosmid文库中筛选β-葡萄糖苷酶的方法:(1)从富含纤维素资源的地点采集土样,提取总DNA,构建fosmid文库,获得富集菌液;(2)将富集菌液于含七叶苷的基础培养基中,20~40℃培养12~24h进行初筛,挑取菌落周围呈现黑色的菌株接种至基础培养基中,20~40℃培养12~24h进行复筛,再将4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷的低熔点琼脂糖溶液均匀平铺在复筛平板上,20~40℃培养0.1~1h,紫外灯下观察菌落周围显荧光的,即得所述β-葡萄糖苷酶产生菌株,进而获得β-葡萄糖苷酶的DNA序列;本发明方法筛选时间短,精度高,误差少。
成果用途:本发明用于大规模从fosmid文库中筛选纤维素酶。
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