一种检测透明质酸酶的荧光方法。
成果介绍:
本发明公开了一种利用阳离子型共轭聚合物和透明质酸探针检测透明质酸酶的荧光方法。该技术的核心是利用透明质酸酶与结合荧光猝灭剂的透明质酸探针发生作用前后,阳离子型水溶性共轭聚合物的荧光猝灭和恢复的程度进行透明质酸酶的检测。当透明质酸酶浓度为零时,共轭聚合物与透明质酸探针通过静电作用结合,共轭聚合物的荧光由于与透明质酸探针上的阿霉素之间的电子转移被猝灭;当透明质酸酶浓度增大时,透明质酸酶与透明质酸发生作用,透明质酸链被水解成片段,大大削弱了共轭聚合物与透明质酸探针的静电结合作用,使两者的距离增大,因此共轭聚合物的荧光得以恢复;共轭聚合物荧光恢复的程度与透明质酸酶的浓度相关,因此根据本方法可以对透明质酸酶进行定量检测。该方法操作简便,响应速度快,成本较低,且具有较高的选择性和灵敏度,是一种分析效率较高的检测方法。本方法结合线性曲线的灵敏度计算得到检测限为 0.075 U/mL。
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