技术详细介绍
本发明涉及一种稳定表达抗TNF?α单克隆抗体的细胞表达体系及构建方法和应用，依照细胞密码子偏爱性将抗TNF?α单克隆抗体的轻、重链编码基因进行优化，构建了以Bak1基因等做为靶标的抗TNFα人鼠嵌合单克隆抗体同源重组载体。
同时针对Bak1等靶标基因外显子区域构建具有特异性切割作用的CRISPR/Case9载体，釆用脂质体转染的方式将两种载体共同导入中华仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞，筛选获得稳定表达抗TNF?α单克隆抗体的阳性细胞株。
本发明可用于抗TNF?α单克隆抗体的高效生产，该抗体可用于类风湿性关节炎、强直性脊柱炎等疾病的治疗。