[01614530]内皮细胞和平滑肌细胞种植于脱细胞基质的血管移植研究

目的：探索体外培养和扩增同一来源血管壁细胞和制备管状脱细胞血管支架的有效方法，将细胞与支架相结合构建新型的组织工程血管。方法：用酶消化法和组织块贴壁法分别建立犬隐静脉的内皮细胞和平滑肌细胞系。应用光镜、电镜和MTT法对内皮细胞和平滑肌细胞的形态和代谢进行研究。模拟血管壁结构及细胞间的相互影响途径，建立以聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜为介质的内皮细胞与平滑肌细胞联合培养模型。分别利用0.1%胰蛋白酶 0.02%乙二胺四乙酸钠(EDTA)和1.0%Triton X-100对犬颈总动脉作用24h和176h进行脱细胞。再将脱细胞血管内表面种植上内皮细胞，回植修复犬颈总动脉缺损。结果：酶消化法和植块培养法可有效建立起内皮细胞和平滑肌细胞系。内皮细胞对联合培养的平滑肌细胞早期增殖有促进作用，晚期则增殖缓慢。酶-化学除垢剂的脱细胞方法几乎使细胞完全脱落，且基质纤维的三维结构变得疏松。体外扩增的异体犬血管内皮细胞可以种植在脱细胞基质上并且具有伸展和增殖功能，可以修复犬颈总动脉缺损，远期通常率高。结论：以脱细胞血管基质为支架构建的组织工程血管具有良好的生物相容性、力学性质和临床应用前景。