技术详细介绍
本发明涉及HIV-1逆转录酶抑制剂的筛选方法，依据HIV-1逆转录酶以单一碱基RNA为模板催化DNA合成，利用biotin-dUTP和digoxigenin-dUTP随机掺入DNA中，形成digoxigenin-biotin双标记的DNA；再通过抗digoxigenin抗体特异性捕获DNA，利用荧光标记链亲和素与biotin标记DNA的特异性结合进行检测，根据荧光强弱可知合成DNA中生物素的量，从而推算HIV-1逆转录酶的活性。本发明克服了以往方法中生物素干扰造成假阳性的难题，对天然产物中的HIV-1逆转录酶抑制活性进行高效、灵敏检测，方法简便，抗干扰能力强，在抗AIDS天然产物的筛选中具有广泛应用前景。