技术详细介绍
本发明首先提供了一种利用实时荧光定量PCR方法检测甘蔗宿根矮化病菌的引物及探针，所述的引物为以下序列的引物对：正向引物序列5'-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3'，反向引物序列5'-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3'，探针序列是FAM-5-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3-TAMRA。以上面提供的引物对与探针在实时荧光定量PCR仪中检测甘蔗中感染的宿根矮化病菌Pat1基因。通过PCR扩增过程生成的Ct值，利用已经建好的标准曲线将Ct值转换成起始反应的核酸分子拷贝数，从而达到定量检测甘蔗中感染宿根矮化病菌的数量。该方法可应用于甘蔗健康种苗检测、甘蔗抗性鉴定方面。