技术详细介绍
本发明提供了一种利用发根农杆菌诱导产生雷公藤毛状根的方法，包括（1）无菌外植体的获得；（2）发根农杆菌菌液的制备；（3）农杆菌侵染诱导毛状根；（4）毛状根离体培养体系的建立，所述毛状根离体培养体系的建立，是在27±1℃暗培养条件下，将毛状根置于含500mg/L头孢噻肟钠的1∕2MS固体培养基中大量培养，每7d继代一次，继代过程中逐渐降低头孢噻肟钠的使用浓度，直至无菌，最后将已完全无菌的毛状根于1∕2MS固体培养基上进行继代培养保存。对产生的无菌雷公藤毛状根进行检测时发现其含有相当数量的雷公藤甲素，明显高于传统雷公藤野生根及组培根中甲素的含量，具有良好的工业化应用前景。利用毛状根培养生产雷公藤甲素，可用以填补中药缺口。