[01347531]泰乐菌素和替米考星残留ELISA方法及试剂盒

该成果由“畜禽产品安全检测新技术研究（2006BAD14B04-3-1）”（系农业部组织由中国农业大学主持的国家科技支撑计划课题“畜禽产品安全检测新技术研究（2006BAD14B04-3）”中的子课题）、食品安全关键技术研究开发与示范（武汉市科技局重大专项，项目编号：20062001018）及武汉市动物性食品残留检测技术研发中心等共同资助完成。该成果通过对泰乐菌素药物分子进行改造，合成了半抗原去碳霉糖泰乐菌素（desmycosin，DES）及相应的人工免疫原。首次成功制备出针对泰乐菌素和替米考星的效价高、特异性强的单克隆抗体。此抗体与其它同类药物及其它类药物均无交叉反应（＜0.2％），加入等量甘油置-20℃保存，有效期至少12个月。应用此单克隆抗体，确立了间接竞争ELISA反应最佳条件，首次建立了猪肌肉、肝脏中泰乐菌素和替米考星残留同时检测的间接竞争ELISA方法。该方法的IC50为泰乐菌素34.5μg/L、替米考星51.9μg/L，在5μg/L～160μg/L范围内线性关系良好，对泰乐菌素的定量限为猪肌肉20μg/kg、猪肝脏30μg/kg，替米考星的定量限为猪肌肉30μg/kg；在定量限、0.5mRL、mRL、2mRL浓度范围内，方法的回收率为83.1％～116.8％，相对标准偏差小于20％。以上述方法为基础，在国内外首次研制出同时检测泰乐菌素、替米考星在猪肌肉和肝脏中残留的ELISA试剂盒。通过与HPLC法的比对试验、动物残留试验，并经多家检测机构和研究单位的复核和应用，结果表明该试剂盒技术参数能满足对这两种化合物残留监控要求，适用于泰乐菌素和替米考星多残留的快速检测。专家鉴定认为，该成果灵敏度高，能同时检测泰乐菌素和替米考星残留，整体技术指标达到国际领先水平，推广应用前景广阔。