[01339903]一种绿色抗菌肽类饲料添加剂技术

“一种绿色抗菌肽类饲料添加剂技术”是在山东省科技发展计划项目（编号2012GSF12113）资助下,利用基因工程技术,建立的具有广谱抗菌和蛋白酶抑制活性的中国对虾含单一乳清酸性蛋白结构（WAP）抗菌肽饲料添加剂的研制技术,主要技术性能指标如下： （1） 首先建立了用大肠杆菌表达可溶性WAP抗菌肽的表达系统,WAP重组蛋白表达量在40%以上,为工业化生产奠定了坚实的基础。 （2） 首先建立了用甲醇诱导毕赤酵母表达WAP抗菌肽的表达系统。通过酵母发酵,甲醇诱导,使WAP抗菌肽直接表达在酵母发酵液里,不用破碎细胞可获得可溶性WAP抗菌肽,有利于产业化。 （3） 首先建立了毕赤酵母组成型分泌表达WAP抗菌肽的技术。通过毕赤酵母高密度发酵,不用甲醇诱导,将WAP抗菌肽组成型分泌表达于发酵液里,避免了甲醇诱导剂的污染,产品安全,工艺简化,成本节约,更利于产业化。 （4） 首先建立了通过WAP转基因果蝇生产WAP抗菌肽的技术。构建了WAP转基因果蝇品系,抑菌实验表明,WAP抗菌肽在果蝇体内表达安全,抑菌率提高86%,果蝇存活率提高52%。用表达WAP抗菌肽的果蝇制备的WAP抗菌肽产品,经沸水浴处理5～30min、pH1-4的酸处理半小时,仍有抑菌活性,对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、真菌有抑菌活性,对多种蛋白酶有抑制活性。给鱼、鸡、致炎小鼠等多种动物试用,抑菌率高达90%,鱼类死亡率降低约30%,增产约21%,鸡的成活率提高约3%,节约鸡苗养殖药费约57%,对致炎小鼠的祛炎效果优于抗生素。 与国内外同类技术比较,中国对虾WAP抗菌肽饲料添加剂技术处领先水平。用该技术生产的WAP抗菌肽饲料添加剂抗菌与抑蛋白酶活性高,对动物有明显的抗菌、消炎与增重功能,是替代抗生素的绿色产品。