[01322092]盐藻β-胡萝卜素（顺式异构体）的抗氧化作用与应用

1、 课题来源与背景

该项目研究获国家科技部八五攻关课题（85-08-07-08）和省自然科学基金（Y2007C032）资助。 β-胡萝卜素（βC）作为食品添加剂和营养增补剂已被联合国粮农组织和世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会推荐，被认定为A类优质营养素。化学合成的βC为全反式构型，难能被人体吸收，西方发达国家禁用于食品添加剂。天然βC来源主要有天然植物萃取法，但βC在生物体内的含量低，一般仅占干重的0.2%左右。杜氏盐藻（Dunaliella Salina，简称盐藻）是迄今人类发现的天然βC含量最高的生物，干体含量高达13%，其安全性、吸收性、抗氧化性优于合成全反式βC，从而形成对天然βC的较高需求。

2、 技术原理及性能指标

1)课题组以专有技术在西北戈壁滩的高寒盐池卤水养殖盐藻，利用西北环境资源、卤水、太阳能，建立盐藻养殖池50多个，每个6000m2，探究了完整的盐藻驯化条件。

2) 以环保、高效、低耗的专利技术制备富含抗氧化活性较高的9-顺式-βC的盐藻浸膏，天然βC的制备方法已获国家发明专利（ZL95115709.4），该工艺可节约投资及运作费、节省能耗费用等约30-50%，节省人力30%，且为绿色、循环制备工艺。

3) 在国内率先采用碘诱导法，并应用C30-HPLC进行反应产物的分离鉴定，建立盐藻βC顺反式异构体的检测方法。结果表明盐藻提取物中9-顺式、11-顺式、13-顺式、全反式βC分别为84.68、13.81、18.98、109.30 mg/g，顺反异构体比例为1：1。

4) 针对脂溶性盐藻βC细胞培养的溶解性难题，采用正交试验设计，按最优处方、最优工艺制备其亚微乳。激光散射法测定亚微乳的粒径和粒度分布，从电镜、Zeta电位、重量径、含量、高温、强光、加速、长期角度证明了O/W亚微乳稳定性。

5) 营养功效学研究以果蝇、小鼠、中老年大鼠、鹌鹑、淋巴细胞为研究对象，探究其抗氧化作用与老年性疾病的关系，研究首次发现盐藻βC防治鹌鹑动脉粥样硬化，提高果蝇寿命，对正常小鼠和大鼠的学习和记忆有明显的促进作用，对记忆获得和再现障碍模型的小鼠有明显改善作用。

研究还证明盐藻βC（12.5～50 mg/kg）对非特异性免疫和体液免疫均有增强作用，对免疫功能低下小鼠亦有明显保护作用;对正常小鼠和环磷酰胺所抑制的细胞免疫功能有促进作用，其机制可能与调节Th/Ts细胞比值有关。

体外实验首次发现盐藻βC（顺式）亚微乳在0.16～0.64μg/mL范围内能剂量依赖性对抗3Gy 60Co 辐射小鼠胸腺淋巴细胞的凋亡。其作用机制可能与盐藻βC能清除氧自由基，尤其是对单线态氧的清除;减少的DNA的断裂;抑制磷酸化p38蛋白的表达有关。

6. 盐藻βC对两种性别的大、小鼠经口急性毒性试验结果表明，LD50＞15g/kg?bw，属无毒物。遗传毒性试验结果表明盐藻βC在试验条件下无致突变作用。亚慢性毒性试验结果表明亦无明显的亚慢性毒性作用。

3、 技术的创造性与先进性

1)专利技术制备盐藻浸膏。盐藻经济符合循环经济和绿色减碳的新理念。

2)国内率先应用碘诱导法和C30-HPLC建立了盐藻βC顺反异构体的分离鉴定与分析方法。

3) 首次以正交试验法优化处方与工艺制备盐藻βC亚微乳。

4)首次从营养学角度发现盐藻βC具有防治动脉粥样硬化、促进学习与记忆、抗衰老与抗辐射作用。

5)完成盐藻天然胡萝卜素胶囊保健食品的研制，获批国食健字G20040847。

6)首次在西北戈壁滩高寒盐池卤水企业化养殖盐藻，完成盐藻的驯化。

4、 技术的成熟程度，适用范围和安全性。本项目技术成熟，适用于大规模生产β-胡萝卜素产品。长期应用已证明本技术的安全性。