[01245081]无刺激性克拉霉素粉针剂的研制

一、课题来源与背景

2018年，《无刺激性克拉霉素粉针剂的研制》课题获淄博市校城融合发展计划项目立项。

克拉霉素（Clarithromycin，Cla）为大环内酯类第三代衍生物，对常见革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌、厌氧菌等均具良好抗菌活性。

临床主要用于呼吸道、泌尿道、皮肤和软组织感染等，不良反应率低，是目前呼吸道，尤其小儿呼吸道感染的首选药。

Cla的剂型包括普通片剂、缓释片、胶囊剂、颗粒剂、干混悬剂和普通静脉注射剂等。

普通静脉注射剂在静脉注射后，由于药物本身的性质而存在严重的血管刺激性，可引起注射局部疼痛，严重时可导致静脉炎，使患者不易耐受，影响了Cla静脉注射剂的临床应用和推广。

为了降低Cla静脉使用时引起的刺激性，可通过脂质体对Cla进行包裹，以掩蔽Cla的药物分子，避免静脉使用时药物与血管的直接作用，可以降低Cla的副作用、毒性，降低静脉注射时的局部刺激作用；还可以克服Cla在水中几乎不溶的难题；并且还具有长效作用，实现缓释，减少给药次数。

因此，以脂质体作为Cla的给药载体，是降低Cla静脉注射所引起刺激性的理想选择。

二、技术原理及性能指标

1.确定处方工艺工艺：将处方量的胆固醇硫酸钠盐（SCS）和磷脂（PC-98T）在67℃下，分散于无水乙醇中完全溶解得到溶液A，将处方量的Cla分散于无水乙醇中全部溶解得到溶液B，将溶液A和溶液B混合后搅拌均匀，得到油相旋转蒸发除去油相中的乙醇，然后用氮气吹干，得到薄膜。将0.08 M pH7.4的PBS置于67℃恒温水浴磁力搅拌器搅拌均匀，制成水相。使膜在67℃下水化30 min（氮气保护下）。67℃超声分散60min，冷却，分别过0.45和0.22 μm膜即得Cla脂质体。处方：Cla 2.0g、PC-98T 6.0g、SCS 2.0g、柠檬酸 0.60 g、0.06 M pH7.4PBS加至100 mL。按此处方制得的脂质体包封率大于94%，粒径分布136±50 nm，载药量大于15 mg·ml-1。

冻干粉工艺：取Cla脂质体100ml，加入15%蔗糖、10%葡萄糖，搅拌溶解；过0.22um滤膜，超滤除菌，量取10ml续滤液，置20ml西林瓶中，-40℃快速预冻12h，再启动冻干程序，冷冻干燥20 h，得冻干粉。

建立质量检测方法，制定质量标准，进行稳定性实验。

色谱条件：色谱柱： Hypersil -C18柱， 250 mm ×4. 6 mm， 5μm （大连依利特分析仪器公司） ;流动相：磷酸二氢钾溶液（0.067 mol·L -1 ， HCL调pH4.0） ∶乙腈= 60∶40，流速1.0 ml·min-1，检测波长210 nm，进样量20μl。

含量测定：精密称取注射用Cla脂质复合物适量，用注射用水水化15min后精密量取1mL置25ml的量瓶中，加等量的甲醇，摇匀破坏脂质复合物，用流动相稀释至刻度，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。

另精密称取Cla对照品约50 mg于100mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，制成每1ml含Cla 0.5 mg的贮备液;然后用流动相稀释成50 mg·L - 1溶液，同法操作，按外标法以峰面积计算。

游离药物含量的测定：取注射用Cla脂质复合物，加注射用水复溶并用 pH7.0的Tris缓冲液稀释至5000 mg·L-1，作为供试液，取供试液1ml两份，一份加入到超滤膜中，离心超滤10min，转速3500r·min-1，分离游离药物和脂质复合物，取离心流出液作为Ⅰ液;另一份1ml直接用甲醇定容至50ml，为Ⅱ液精密量取Ⅰ、Ⅱ液各20μl注入液相色谱仪，按照标准曲线方程计算药物的浓度C1、C2。游离药物的含量为C1/50C2。

结果测定三批样品，Cla脂质复合物混悬液中游离药物的含量均在2％以下。

稳定性考察：将冻干样品于室温（25±2 ℃）干燥条件下保存12个月后，外观、pH值、粒径和包封率均无显著变化，故认为冻干Cla脂质体复合物采用西林瓶包装，预测在该储藏条件下稳定性良好，有效期为2年。

3.刺激性试验 小鼠抓挠试验、 大鼠舔足试验、 兔耳静脉刺激性试验表明：初步证实Cla冻干脂质体可以显著的降低疼痛和血管刺激性。

三、技术的创造性与先进性

1.创新性提出采用包合技术，对Cla进行包裹，避免短时间内大量药 物浓集在血管壁，降低Cla静脉使用时引起的刺激性。

确定了Cla粉针剂的处方工艺， 制备了Cla粉针剂，制定了质量标准。

刺激性试验初步证实本研究制备的Cla冻干脂质体可以显著的降低疼痛和血管刺激性，为临床试验提供可靠的数据。

预测Cla粉针剂的有效期为 2 年，产品采用西林瓶包装，阴凉干燥处储存，为上市包装材料的确定提供依据。

应用情况与存在问题Cla脂质体粉针剂研制成功，显著降低了其普通静脉注射剂在静脉注射时的局部刺激性问题，丰富了Cla剂型，填补制剂领域的空白;在条件成熟时，向厂家推荐进行临床试验，进而申请新药证书和生产文号，将成果转化为工业化生产，上市销售，实现该制剂的经济效益和社会效益。