[01235679]蜂胶黄酮抗病毒和疫苗佐剂活性的研究及应用

1、任务来源： 本项目为河南牧业经济学院、河南省康星生物科技有限公司与河南省康星药业股份有限公司校企合作项目。 2、应用领域和技术原理。 目前,畜禽疫病的发生频率和种类大大增加。一方面,旧的疫病未能得到控制出现新的变异;另一方面,一些新病又在不断增加;使得一些疫病疫苗的防控效果不佳。随着分子免疫学、分子生物学等学科的发展,畜禽疫苗的种类越来越多。近年来,多肽疫苗、基因重组疫苗和核酸疫苗发展快速,这些疫苗比传统的疫苗虽然安全,但其免疫原性较弱,需要良好的佐剂辅助才能发挥强大的免疫应答。 蜂胶含有黄酮类、有机酸、萜烯类、芳香醛、酯类、醇类及多种氨基酸、维生素、酶、矿物质等物质。有效成分主要是黄酮类化合物。蜂胶具有调节免疫力,抑制病毒、抗菌、抵氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等作用。已经逐步受到食品界、医学界、畜牧兽医界等的关注。蜂胶是一种天然的高效免疫增强剂,能促进机体免疫过程。 3、主要研究内容及成果的创造性、先进性。 （1）制备得到高纯度的蜂胶黄酮：本项目通过在采用传统酸碱沉淀法提取蜂胶黄酮的基础上经多次重复提取,获得蜂胶黄酮含量达80%以上。 （2）确定了宿主细胞抵抗不同结构病毒感染特性：本研究采用同一宿主细胞CEF比较了蜂胶黄酮对NDV（有囊膜）和IBDV（无囊膜）抗感染活性;采用PK-15细胞比较了蜂胶黄酮对TGEV（有囊膜）和PPV（无囊膜）抗感染活性。并且确定了蜂胶黄酮提高宿主细胞抵抗有囊膜病毒作用主要体现在作用前期,而蜂胶黄酮提高宿主细胞抵抗无囊膜病毒用主要体现在病毒感染的后期。并通过宿主细胞感染不同病毒后分泌细胞因子结果,证实蜂胶黄酮提高有囊膜病毒感染宿主细胞PK-15细胞产生抗感染因子能力高于无囊膜病毒。 （3）确定了不同结构病毒疫苗蜂胶佐剂的使用方法：采用不同的用药方式（与疫苗同时使用,分别使用）及用药途径（口服、肌注）研究蜂胶黄酮提高鸡新城疫疫苗（活疫苗）和猪细小病毒疫苗（灭活疫苗）的体液免疫和细胞免疫活性。在新城疫灭活疫苗中可以通过肌注方式使用,在活新城疫疫苗中可以通过口服途径使用。蜂胶黄酮可以直接作为一种PPV疫苗佐剂,进行制备蜂胶黄酮PPV疫苗使用。