技术详细介绍
现代免疫学研究和环境污染调查表明,人类活动所产生的食物链污染、饮用水源污染、工业大气污染和放射性污染等有害因子进入环境中,引起环境系统结构和功能发生变化,致使人类在日常饮食、呼吸、皮肤接触和使用化学药物时,自身不可避免地暴露于各种细胞致畸变环境中,导致生命体细胞畸变。大大增加了肿瘤出现的概率,降低了人类、动植物各生物物种繁殖的成功率。众多研究表明细胞畸变在癌症形成过程中起着决定性作用,已经成为人类潜在的最大健康危害。因此,研发各类抗细胞畸变的保健产品成为防癌、治癌领域的一个研究热点。多年来研究人们发现,中药药源广、毒性低,不但能够温肾疏肝、疏通径路、补益脾胃、根治沉疴痼疾,在细胞畸变防护上也显示出巨大的潜力和优势。 天然植物提取物因含有多种生物活性成分,对细胞能产生抗氧化、免疫调节、抗突变等多种药理作用。但依靠动物实验从天然物质中筛选抗突变药物,耗时费力,经费投入大,且由于药物筛选要求实验方案标准化和定量化,因此传统的动物实验在药物筛选中较少应用。细胞水平的药物筛选虽然是更接近生理条件的一种药物筛选模型,准确率更高,但需要建立细胞模型,操作更复杂,成本更高,且干扰较多,不易排除,数据间的平行较差。 鼠伤寒沙门氏菌 Salmonella typhimurium TA1535/pSK1002带有通过 pSKl002 质粒整合于鼠伤寒沙门氏菌TAl535菌株的DNA伤,细菌即产生SOS反应,生成具有活性的蛋白水解酶recA,该酶介导lexA蛋白的裂解,使受封闭的umuC 操纵子启动,并带动 lacZ 基因转录、翻译,生成β-半乳糖苷酶,根据β-半乳糖苷酶的生成量,即可判断DNA受损的程度。 本研究试利用单细胞微生物鼠伤寒沙门氏菌和 SOS/umu测试,建立抗丝裂霉素C遗传毒性的植物提取物体外筛选方法,并结合中药复方配伍理论,将筛选到的具显著抗细胞畸变活性的植物提取物配对组合,进行小鼠体内实验,以进一步评价和验证筛选结果,从而建立抗细胞畸变药物或植物提取物的快速、高通量的筛选体系。然后以 SOS/umu 测试筛选得到的具有显著抗畸变活性的植物提取物和鲜乳为主要原料,开发一种安全抗细胞畸变的保健型酸奶。以期达到减少细胞畸变、降低癌症风险、增强免疫力的功能效果;同时,扩大植物提取物的应用范围,增加保健乳品种类,弥补市场空白,为寻求可食性天然抗畸变保健品,预防人类细胞畸变和癌症做初步研究。
现代免疫学研究和环境污染调查表明,人类活动所产生的食物链污染、饮用水源污染、工业大气污染和放射性污染等有害因子进入环境中,引起环境系统结构和功能发生变化,致使人类在日常饮食、呼吸、皮肤接触和使用化学药物时,自身不可避免地暴露于各种细胞致畸变环境中,导致生命体细胞畸变。大大增加了肿瘤出现的概率,降低了人类、动植物各生物物种繁殖的成功率。众多研究表明细胞畸变在癌症形成过程中起着决定性作用,已经成为人类潜在的最大健康危害。因此,研发各类抗细胞畸变的保健产品成为防癌、治癌领域的一个研究热点。多年来研究人们发现,中药药源广、毒性低,不但能够温肾疏肝、疏通径路、补益脾胃、根治沉疴痼疾,在细胞畸变防护上也显示出巨大的潜力和优势。 天然植物提取物因含有多种生物活性成分,对细胞能产生抗氧化、免疫调节、抗突变等多种药理作用。但依靠动物实验从天然物质中筛选抗突变药物,耗时费力,经费投入大,且由于药物筛选要求实验方案标准化和定量化,因此传统的动物实验在药物筛选中较少应用。细胞水平的药物筛选虽然是更接近生理条件的一种药物筛选模型,准确率更高,但需要建立细胞模型,操作更复杂,成本更高,且干扰较多,不易排除,数据间的平行较差。 鼠伤寒沙门氏菌 Salmonella typhimurium TA1535/pSK1002带有通过 pSKl002 质粒整合于鼠伤寒沙门氏菌TAl535菌株的DNA伤,细菌即产生SOS反应,生成具有活性的蛋白水解酶recA,该酶介导lexA蛋白的裂解,使受封闭的umuC 操纵子启动,并带动 lacZ 基因转录、翻译,生成β-半乳糖苷酶,根据β-半乳糖苷酶的生成量,即可判断DNA受损的程度。 本研究试利用单细胞微生物鼠伤寒沙门氏菌和 SOS/umu测试,建立抗丝裂霉素C遗传毒性的植物提取物体外筛选方法,并结合中药复方配伍理论,将筛选到的具显著抗细胞畸变活性的植物提取物配对组合,进行小鼠体内实验,以进一步评价和验证筛选结果,从而建立抗细胞畸变药物或植物提取物的快速、高通量的筛选体系。然后以 SOS/umu 测试筛选得到的具有显著抗畸变活性的植物提取物和鲜乳为主要原料,开发一种安全抗细胞畸变的保健型酸奶。以期达到减少细胞畸变、降低癌症风险、增强免疫力的功能效果;同时,扩大植物提取物的应用范围,增加保健乳品种类,弥补市场空白,为寻求可食性天然抗畸变保健品,预防人类细胞畸变和癌症做初步研究。