[01174930]快速检测结核分枝杆菌利福平耐药突变基因

结核分枝杆菌耐药基因指纹分析快速检测法项目所属科学技术领域为临床诊断学　　适用范围：结核分枝杆菌快速诊断及个体化治疗　　主要研究内容及解决的主要技术问题：该项目主要内容旨在探讨分子生物学方法在临床标本结核分枝杆菌利福平（RFP）耐药性评估中的应用价值。解决的主要技术内容：设计针对rpoB基因183bp扩增引物，PCR扩增方案结果显示，RFP敏感株无rpoB基因突变，耐药株均发生碱基突变，分别导致编码531及526位点的氨基酸改变。　　特点：银染PCR-SSCP方法具有简便，快速，准确的特点，提高敏感性，可以对临床标本结核杆菌利福平耐药突变进行鉴定。序列分析证明结核分枝杆菌利福平耐药菌株有rpoB基因突变。技术创新点：卫生部医药卫生科技项目查新咨询报告可见该项目针对结核分枝杆菌耐利福平临床分离株ropB基因183BP片段在国内外均未见报道。　　对科学技术进步的推进作用、推广应用及经济社会效益：结核病疫情在近十几年来出现全球明显回升趋势，耐药结核菌株的产生和播散是其中重要原因之一。利福平（RFP）是抗结核短程治疗药物的重要成分之一，对利福平耐药常导致化疗失败，患者预后不良。有报道表明，对利福平耐药是多耐药菌株的一个标志。对于结核病患者的利福平耐药性早期进行明确诊断，有助于指导临床用药。为探讨分子生物学方法在快速鉴定结核分枝杆菌的利福平耐药性中的应用价值，该项目设计了针对rpoB基因突变高发区的特异引物，应用单链构象多态性技术（SSCP）银染色法对结核分枝杆菌临床分离株进行了检测，对菌株进行了序列分析。本方法的建立为结核病的快速诊治提供了有效的途径。