[01126639]贵州省猪伪狂犬病流行病学及防控与净化技术的研究

成果是在省农业攻关项目“贵州省规模化猪场主要病毒性疫病的调查及综合防控对策的研究与示范”（黔科合NY字（2011）3103号）、贵州省科学技术基金项目“猪伪狂犬病毒贵州株的分离鉴定及gE基因的克隆研究”（黔科合J字（2007）2065）和贵州省动物疫病预防控制中心项目“猪伪狂犬病流行病学及防控净化技术的研究（2012～2014）”等课题的资助下完成的,取得了以下成果： 1、成果利用猪伪狂犬病的gB/gE-ELISA血清学监测猪伪狂犬病免疫抗体水平和PRV野毒感染状况,明确了贵州省猪伪狂犬病的免疫状况和野毒隐性感染状况,摸清了贵州省猪伪狂犬病的分布区域和流行情况; 2、通过分子流行病学研究,弄清了贵州省PRV流行毒株的系统发育进化树和遗传背景,分离鉴定出猪PRV Guizhou-DY和GZ-Z1株的gE全基因序列,GenBank收录编号分别为JX417716和HQ832846。研究发现我省猪伪狂犬病病毒分子发生了变异,但PRV 基因缺失疫苗仍然是我省猪伪狂犬病预防的主要疫苗。 3、成果完成了对PRV Guizhou-DY株gE636基因原核表达的研究,结果表明加入佐剂比单独用gE636蛋白更能刺激机体产生免疫反应,但免疫效果不佳。真核表达研究发现：pcDNA3.1（+）-gE2-IL-2融合表达质粒和pcDNA3.1（+）-gE1、pcDNA3.1（+）-IL-2联合免疫质粒能够诱导小鼠产生较高水平的体液免疫和细胞免疫,但在仔猪体内未见表达,表明其对仔猪的免疫效果不佳,不如伪狂犬病基因缺失活疫苗。说明了猪伪狂犬病基因缺失活疫苗目前在猪伪狂犬病的预防上不可替代性,且利用gE/gB-ELISA抗体监测可鉴别猪伪狂犬病野毒和疫苗毒。 4、成果建立了鉴别猪伪狂犬病野毒和疫苗毒感染的三重PCR方法和鉴别猪瘟和猪伪狂犬病野毒和疫苗毒感染的五重PCR方法,这是本研究的关键技术,结合gB/gE-ELISA血清学监测,对猪伪狂犬防控和净化措施临床应用效果良好,可以在实际生产中推广。 5、成果开展了伪狂犬防控和净化的研究,成功控制和净化了10个示范猪场猪伪狂犬病的发生和流行,为我省规模化猪场猪的健康养殖提供了切实可行的技术保障。