[01115877]三穗鸭养殖环境健康监测及主要疫病防控与应用

三穗鸭作为发展贵州鸭产业的重要品种品牌,在贵州省畜禽养殖结构中占有重要的比重,2019年三穗县鸭业综合产值达6.6亿元,占全省鸭业总产值的50%以上。在发展鸭养殖业过程中,环境影响及主要疫病的发生是制约鸭产业发展的重要因素。2011年以来,本项目组对三穗鸭养殖场的养殖环境、主要疫病病原和疫病免疫防控进行了系统研究,开展产学研联合攻关,取得如下创新性成果： 1. 开展了矿区和非矿区的土壤和水体重金属检测及鸭禽流感抗体效价普查和评价工作,提示养殖环境与鸭禽流感免疫效果存在相关性。 开展矿区土壤和水体重金属检测（11份）及鸭禽流感抗体效价普查（30个规模养鸭场）,结果显示矿区（合格率63.5%）和非矿区（合格率56.5%）禽流感抗体效价均普遍较低,且矿区的鸭禽流感抗体效价更低。由于重金属镉对免疫机能有重要影响,为此,项目组将重金属镉纳入影响鸭免疫效果的考察范围。项目组通过建立鸭慢性镉中毒模型,利用石墨炉原子吸收光谱法,研究了重金属镉在鸭不同组织器官的富集规律,发现了镉主要富集器官为肝脏和肾脏,且镉在鸭体内各组织器官的富集随时间的推移而增加;研究了镉对动物机体细胞损伤,发现在给予高镉饲喂条件下实验动物血清中SOD、GSH-Px、MDA水平均受不同程度影响,且MT mRNA相对表达量可以作为指示镉中毒早期的一个指标;研究了鸭群在给予高镉饲喂条件下实验动物不同日龄免疫器官病理变化情况,发现各免疫器官特有组织结构发生病理损伤变化;研究了镉对鸭机体免疫应答的影响,实时监测实验动物在给予高镉饲喂条件下实验鸭血清中禽流感H5抗体变化,发现镉残留对三穗鸭的免疫器官有实质性损伤,同时影响鸭禽流感等疫苗的免疫应答。 2. 针对三穗鸭主要疫病病原,进行分离鉴定、耐药性分析、致病性分析和贵州流行毒株灭活疫苗的制备及免疫研究,获受理发明专利1项。 围绕贵州三穗鸭群中发生的主要疫病进行毒株分离鉴定：分离获得38株鸭疫里默氏杆菌,经鉴定以血清2型为主;对三穗县6个中大型规模养鸭场分离的细菌经生化试验、PCR鉴定,鉴定出137株7个属的细菌,且埃希氏菌、葡萄球菌、鸭疫里默氏杆菌、大肠杆菌为主要优势分离菌;从50份无临床症状鸭中分离得到1株低致病性禽流感（H6N6型）流行毒株,经进化树分析发现H6N6亚型存在明显的遗传多样性。在此基础上,开展了鸭疫里默氏杆菌2型灭活疫苗的研制及细菌耐药性和致病性研究,发现所研制的灭活疫苗免疫保护率达87.5%,高于商品化的同类灭活疫苗（62.5%）,获受理发明专利1项,而对细菌耐药性和致病性研究发现主要病原菌存在多重耐药性,其中大肠杆菌多重耐药性最为严重,葡萄球菌相对较轻,而鸭疫里默杆菌则集中在8～14耐。 3. 首次开展鸭免疫增强剂筛选和免疫力衡量指标比较研究,集成了鸭免疫增强剂的质量控制和递送技术,创制鸭免疫增强剂开发关键技术,获受理发明专利1项。 应用鸭IL-8真核质粒、中草药金荞麦、细菌内毒素及黄芪多糖开展了鸭免疫增强剂的筛选研究。通过监测鸭体液免疫、细胞免疫和体重增长变化,发现鸭IL-8真核质粒具有较好的应用前景。运用统计学方法,对鸭体液免疫水平与细胞免疫水平进行相关性分析,发现IL-2和IFN-γ的水平与禽流感抗体效价呈显著（P＜0.05）或极显著（P＜0.01）正相关,提出了为准确测定鸭抗体效价,在检测体液免疫效价（IgG）时,可合并检测IL-2和IFN-γ水平,完善了鸭免疫力准确检测问题,完成了鸭免疫增强剂的污染物监测、均一性与一致性检测、稳定性与安全性评价试验等,制定了鸭免疫增强剂生产质量控制技术措施,确定了肌肉注射是最经济有效的方案,创制完成鸭免疫增强剂的研制,获受理发明专利1项,并应用于生产实践,提高了鸭群免疫效果,经济社会效益显著。 4.通过推广应用取得明显的社会和经济效益 项目成果自2014年推广以来共历时6年,将水禽免疫增强剂关键技术研究成果和鸭疫里默氏杆菌2型灭活疫苗在贵州省三穗县进行推广应用,2014~2019年6年间共计推广规模达62.54万羽,新增纯收益392.33万元,总经济效益达3138.89万元,发表论文27篇（其中SCI 1篇,一级学报2篇）,本项目制定标准1项（第7,8部分）,申请发明专利2项,培养硕士研究生5名,培养本科生7名,取得了显著的经济和社会效益。