[01110274]法尼基转移酶抑制剂联合Bcl2 siRNA诱导白血病干细胞凋亡

任务来源：2009年吉林省科技发展计划项目,任务书编号为：20090454。 应用领域：本研究在已有的研究基础上,联合FTI和Bcl2 siRNA选择性诱导LSC凋亡,这必将极大促进LSC特异靶点的治疗,达到治愈急性髓系白血病（AML）的目的,也为通过调节信号系统诱导LSC肿瘤干细胞凋亡的新方法建立提供科学、客观的实验和理论依据。 技术原理：急性髓性白血病复发的根本原因是耐药白血病干细胞的存在,功能紊乱的白血病干细胞大量增殖引发白血病,清除白血病干细胞是白血病治疗的难点。法尼基蛋白转移酶抑制剂是一种新的信号转导抑制剂,治疗肿瘤基于ras癌基因的研究。 性能指标：本课题通过流式细胞仪、免疫印迹法、RT-PCR和siRNA干扰等方法, 1)明确了HSC和LSC线粒体凋亡途径的差异; 2)证明了FTI和siRNA能有效地诱导LSC凋亡,从而选择性清除LSC而对正常HSC无明显影响,并明确其作用机制; 3)明确了Bcl2家族在FTI诱导LSC凋亡中的作用,为急性髓性白血病治疗找出了新靶点; 4)在国内外有影响的杂志发表论文6篇。 国内外同类技术比较： AML是常见的血液系统恶性疾病,复发仍然是AML病人的主要死亡原因,最新的研究认为LSC是白血病耐药和复发的根本原因。清除LSC成为AML治疗的新目标。最近的研究发现LSC存在一些与生存有关的信号转导系统异常激活,如Flt 3、Ras、PI3K、NF-κB等,这些途径只在LSC表达,而在正常造血干细胞（hematopoietic stem cell,HSC）不表达。这些信号如NF-κB有抗凋亡的功能,使LSC凋亡通路缺陷,常规化疗药不能诱导其凋亡。针对这些信号转导系统的异常激活,有研究发现蛋白酶体抑制剂MG-132和PS-341通过特异性抑制NF-κB而诱导LSC凋亡而对正常HSC没有明显影响,Parthenolide通过特异性抑制NF-κB而诱导LSC凋亡,而对HSC无毒性作用;Flt3和PI3K抑制剂也能使某些原始的AML细胞凋亡,这些研究都是通过选择性诱导LSC凋亡而实现LSC特异靶点治疗,且都取得一定的效果,提示通过诱导凋亡清除LSC有继续研究的价值。但蛋白酶体抑制剂总的毒性仍不明确,单药的作用仍不理想,有必要进一步寻求更有效诱导LSC凋亡的方法。 成果创造性、先进性： 本课题在已有的研究基础上,联合FTI和Bcl2 siRNA选择性诱导LSC凋亡,为通过调节信号系统诱导LSC凋亡的新方法的建立提供科学、客观的实验和理论依据。 1)直接针对AML复发的根本原因LSC为靶点,立足于治愈AML; 2)调节信号系统选择性诱导LSC凋亡,减少复发; 3)探讨了LSC和HSC线粒体凋亡信号通路的差异,寻找LSC清除的特异靶点; 4)利用Bcl2家族 siRNA诱导LSC凋亡; 5)发现了FTI能通过线粒体凋亡通路诱导LSC凋亡及联合FTI和Bcl2 siRNA可协同诱导LSC凋亡的机制; 6)寻找一种特异针对LSC的治愈白血病的策略。 作用意义（直接经济效益和社会意义）：本课题将应用新近发展起来的siRNA技术,直接对LSC细胞和HSC细胞进行筛选鉴定。将分子靶向治疗药物FTI与Bcl2siRNA联合应用于LSC细胞,对其进行凋亡的检测及作用机制的研究,从而达到治疗白血病新方法的建立,为其提供科学、客观的实验和理论依据。与临床连接紧密,为下一步应用研究奠定基础。如今后应用于临床,预期可获得良好经济和社会效益。 推广应用前景与措施：本课题将应用新近发展起来的siRNA技术,直接对LSC细胞和HSC细胞进行筛选鉴定。将分子靶向治疗药物FTI与Bcl2siRNA联合应用于LSC细胞,对其进行凋亡的检测及作用机制的研究,从而达到治疗白血病新方法的建立,为其提供科学、客观的实验和理论依据。与临床连接紧密,为下一步应用研究奠定基础。