[01093987]用双水相萃取从基因工程菌发酵液中提取青霉素酰化酶
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技术详细介绍
双水相体系萃取是世界各国都在研究开发的一种适用于生物活性物质大规模分离和纯化的新技术。生物技术开发了许多基因工程产品，青霉素酰化酶就是基中之一，它是由青霉素生产各种半合成的新型抗生素药物的重要原料。该成果以培养大肠杆菌ＡＳ１．７６生产青霉酰化酶，用溶媒－渗透压法将该酶从细胞内释放出来，释放率可近于１００％；以聚乙二醇／磷酸钾双水相体系提取和纯化青霉素酰化酶，经优化工艺条件，单级萃取率达９６％以上。采用超滤法回收萃取体系时，青霉素酰化酶的收率为９１％，总收率达８８％，对杂蛋白的纯化系数达１５３。该工艺操作简便，酶活收率高，纯化倍数大，是一种高的新工艺，属国内首创，达到国际先进水平。该方法对其他酶有一定普遍意义。