[00101771]植物单花粉高通量收集与PCR检测方法
交易价格：
面议
所属行业：
生物医药
类型：
非专利
技术成熟度：
正在研发
交易方式：
技术转让
联系人：
福建农林大学
进入空间
所在地：福建福州市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
本发明公开一种植物单花粉高通量收集与PCR检测方法,包括步骤为:显微镜分离花粉以及花粉破囊壁和染色;分装碱性裂解液于PCR板中,密封并离心使裂解液沉于管底;显微镜下用特殊镊子挑选着色单花粉粒并放入PCR管裂解液中;分装矿物油于PCR板中,短暂离心;置于PCR仪上90-98℃温度下裂解;在各管中加入TE缓冲液中和,离心,加入PCR反应成分;短暂离心,置于PCR仪上,反应参数为:90-98℃保持3-8分钟,热循环依不同反应而定,循环数为35-40,最后72℃延伸5-10分钟,保持于4℃下;PCR产物用电泳分离并在成像系统上进行扫描拍照。本发明具有效率高等优点,特别适用于生殖遗传统计分析。
本发明公开一种植物单花粉高通量收集与PCR检测方法,包括步骤为:显微镜分离花粉以及花粉破囊壁和染色;分装碱性裂解液于PCR板中,密封并离心使裂解液沉于管底;显微镜下用特殊镊子挑选着色单花粉粒并放入PCR管裂解液中;分装矿物油于PCR板中,短暂离心;置于PCR仪上90-98℃温度下裂解;在各管中加入TE缓冲液中和,离心,加入PCR反应成分;短暂离心,置于PCR仪上,反应参数为:90-98℃保持3-8分钟,热循环依不同反应而定,循环数为35-40,最后72℃延伸5-10分钟,保持于4℃下;PCR产物用电泳分离并在成像系统上进行扫描拍照。本发明具有效率高等优点,特别适用于生殖遗传统计分析。
